小伙伴,您是否对使培养基接种后彻底灭菌的方法和培养基灭菌方法感到陌生?别担心,今天我将为大家介绍一些关于使培养基接种后彻底灭菌的方法和培养基灭菌方法的知识,希望能够帮助大家更好地了解这个话题。

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使培养基接种后彻底灭菌的方法?

1、高压蒸汽灭菌:高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下,温度121℃时,灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则有机物质特别是维生素类物质就会在高温下分解,失去营养作用,也会使中海培养基变质、变色,甚至难以凝固。将蒸馏水或自来水装在三角瓶中,装水量一般不超过瓶的2/3,用牛皮纸或硫酸纸包扎封口,然后放入高压锅中灭菌后即为无菌水。灭菌后的培养基可放到培养室中预培养3d,若无污染现象,则证明灭菌是彻底的,可以使用。暂时不用的培养基置于10℃下保存。含IAA或GA3的培养基应在1周内用完,其他培养基zui多也不要超过1个月。
2、过滤灭菌:一些植物生长调节剂及有机物,如IAA、GA3、ZT、CM等,遇热容易分解,不能与培养基一起进行高温灭菌,而要使用细菌过滤器滤去其中的杂菌。细菌过滤器与滤膜(孔径0.45微米)使用之前要先进行高压灭菌。过滤后的溶液要立即加入培养基中,若为液体培养基,可在培养基冷却至30℃时加入;若为固体培养基,必须在培养基凝固之前(50-60℃)加入,振荡使溶液与其他成分混合均匀。

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培养基灭菌方法

1.灼烧灭菌
将微生物的接种工具,如接种环、接种针或其他金属用具,直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌。此外,在接种过程中,试管口或瓶口等容易被污染的部位,也可以通过火焰灼烧来灭菌。
2.干热灭菌
将灭菌物品放入干热灭菌箱内,在160~170℃加热1~2h可达到灭菌的目的。能耐高温的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等,可以采用这种方法灭菌。
3.高压蒸汽灭菌
将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内。把锅内的水加热煮沸,将其中原有的冷空气彻底排除后,将锅密闭,继续加热使锅内的气压逐步上升,温度也随之升到100℃以上。为达到良好的灭菌效果,一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下,维持15~30
min。

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