对于西方的指控，俄罗斯迅速予以否认。据俄国际文传电讯社报道，俄罗斯武装力量总参谋部操作管理总局局长安德烈·卡尔塔泼洛夫上将21日表示，俄方没有向乌克兰民兵提供过“山毛榉”防空导弹或其他武器及军事技术设备。他还表示，在MH17坠机事故发生前，俄方监测到一架乌克兰苏-25战斗机贴近马航飞机飞行，距离只有3到5公里。俄方称，在马航客机坠毁时，美国方面有一颗卫星飞越该区域，俄方要求美国公开这些卫星图像的数据。俄新社称，卡尔塔泼洛夫上周四曾在新闻发布会上提供MH17飞机的飞行路线图。他表示，飞机坠毁当天乌克兰武装力量防空部队集团军在顿涅茨克附近有3到4个“山毛榉-MI”系统防空导弹营。
“任何人都不应将马航客机坠毁事件用于狭隘自私的政治目的。”“俄罗斯24”电视台21日播出普京的声明说：“我想就顿涅茨克上空发生的可怕悲剧事件再次表明俄罗斯如何看待目前的乌克兰局势。我们曾不止一次呼吁交战各方立即停止流血冲突，坐到谈判桌前。可以确信地说，如果6月28日乌克兰东部没有恢复军事行动，这场悲剧就一定不会发生。”普京还表示，这种事件不应使人们分裂，而应使人们团结起来。有必要尽一切努力确保国际专家在空难现场的工作安全。俄塔社21日称，普京20日分别与英国、澳大利亚、荷兰和德国领导人通电话，表示俄方愿为马航客机空难调查提供必要帮助，并强调在调查结束前应避免发表政治化声明。